FREE

Hồ sơ

Trường Đại học Khoa học Tự nhiên Quốc gia: Việt Nam Tỉnh thành: Hà Nội Ngày tham gia: 14/09/2018 Thành viên miễn phí Sản phẩm chính: đào tạo về lĩnh vực Khoa học Tự nhiên, nghiên cứu về lĩnh vực Khoa học Tự nhiên, chuyển giao công nghệ về lĩnh vực Khoa học Tự nhiên Xem thêm Liên hệ

Quy trình công nghệ sản xuất protease HIV-1 tái tổ hợp

Ngày đăng: 17/09/2018

Liên hệ

Xuất xứ: Việt Nam

Bảo hành: liên hệ

Phương thức thanh toán: tiền mặt hoặc chuyển khoản

Khả năng cung cấp: theo nhu cầu của khách hàng

Đóng gói: liên hệ

Liên hệ

Thông tin chi tiết

Mô tả quy trình công nghệ sản xuất protease HIV-1 tái tổ hợp:

I) Nhân bản đoạn gen mã hoá protease HIV-1 (HIV-1Pr) bằng PCR từ vector pCR2.1-HIV-1Pr (mã số HQ317454 trên Genbank)
III) Thiết kế biểu hiện gen HIV-1Pr bằng vector pET32a (gen được đưa vào vị trí của cặp enzyme giới hạn BamHI và XhoI của pET32a);
IV) Biến nạp plasmid tái tổ hợp pET32a-HIVPr vào tế bào vi khuẩn E. coli BL21 (DE3) RIL;
V) Cảm ứng biểu hiện gen HIV-1Prtrong tế bào biểu hiện BL21 (DE3) RIL
VI) Tinh sạch sơ bộ loại bỏ các protein không mong muốn bằng rửa tủa tế bào trong đệm B (Tris-HCl 20 mM pH 7,9 có NaCl 100 mM, urea 2M và Triton X-100 1%);
 VII) Tinh sạch protease HIV-1 sử dụng hệ thống cột Q-sepharose
VIII) Hồi tính protease HIV-1 bằng thẩm tích trong đệm D (Tris–HCl 20 mM, pH 7,9, NaCl 100 mM, PMSF 1 mM, 10% glycerol và DTT 1 mM) với nồng độ urea giảm dần.